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要確保BMP6標(biāo)準(zhǔn)品分裝的準(zhǔn)確性，可從?操作前準(zhǔn)備、分裝過(guò)程控制、分裝后核對(duì)?三個(gè)環(huán)節(jié)把控，具體方法如下：

一、操作前準(zhǔn)備：校準(zhǔn)工具，提前規(guī)劃

?校準(zhǔn)移液槍?：分裝前用校準(zhǔn)過(guò)的移液槍分裝，確保移液體積誤差控制在±1%以?xún)?nèi)，避免大體積偏差影響濃度；

?提前計(jì)算分裝體積?：根據(jù)單次實(shí)驗(yàn)需要的最高濃度母液量確定每管分裝體積，常規(guī)96孔實(shí)驗(yàn)分裝?100-200μL/管?即可，不要隨意增減；

?預(yù)冷離心管?：分裝配制好的標(biāo)準(zhǔn)品提前放在冰盒上，離心管也提前預(yù)冷，避免溫度變化導(dǎo)致體積膨脹或蛋白降解。

二、分裝過(guò)程：規(guī)范操作控誤差

?混勻后再分裝?：復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品輕輕顛倒混勻，室溫靜置5分鐘讓溶液均勻，不要?jiǎng)偧油晗♂屢壕土⒓捶盅b，避免濃度不均勻；

?貼壁加樣，避免氣泡?：移液時(shí)槍頭貼離心管管壁緩慢打出液體，避免產(chǎn)生氣泡導(dǎo)致體積不準(zhǔn)，也避免蛋白因氣泡剪切力變性；

?每管核對(duì)體積?：分裝10管后抽查1-2管，用移液槍復(fù)核體積，偏差超過(guò)5%需要重新校準(zhǔn)移液槍后再繼續(xù)分裝；

?快速分裝，及時(shí)凍存?：全程在冰盒上操作，控制分裝時(shí)間在30分鐘以?xún)?nèi)，分完立即放入-20℃凍存，避免標(biāo)準(zhǔn)品長(zhǎng)時(shí)間放在室溫降解。

三、分裝后核對(duì)：做好標(biāo)記，避免偏差

每管都清晰標(biāo)注母液濃度和分裝日期，不要漏標(biāo)，避免后續(xù)使用時(shí)濃度弄錯(cuò)；

同一批次分裝完成后，可隨機(jī)選1管做預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.98、回收率合格，說(shuō)明分裝濃度準(zhǔn)確。

關(guān)鍵提醒

分裝誤差主要來(lái)自移液槍不準(zhǔn)和體積規(guī)劃錯(cuò)誤，只要提前校準(zhǔn)移液槍、按單次用量分裝，就能保證濃度誤差控制在5%以?xún)?nèi)，實(shí)驗(yàn)要求。